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人ELISA试剂盒,人细胞间粘附分子3ELISA试剂盒现货
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人ELISA试剂盒,人细胞间粘附分子3ELISA试剂盒现货

发布时间:2015/10/13   更新时间:2018/6/7

型 号:

价 格: 2600

采购度:265

原产地:美洲

简单介绍:人细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

详细信息
工作原理
一、“人细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)elisa试剂盒”实验原理
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗C3抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗C3抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的C3呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
二、“人细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒”的四大特性
1.特异性强:不与其它细胞因子反应。
2.重复性好:板内、板间变异系数均小于10%。
3.稳定性高:实验效果很稳定。
4.超灵敏度:*小的检测浓度小于1号标准品,稀释度和样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

注意事项

三、人细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒操作注意事项
(1)试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
(2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
(3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
(4)使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
(5)使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
(6)洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
(7)底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
(8)加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
(9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
四、正确操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件
1. 加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。
2. 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。
3. 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4. 合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
五、Elisa试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品(480ng/L) 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
使用方法
六、试剂的准备之保温
在 ELISA 中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育(incubation),有人称之为孵育,在ELISA 中似不恰当。ELISA 属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例,加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会,只有*贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA 反应总是需要一定时间的温育。
温育常采用的温度有 43℃、37℃、室温和4℃(冰箱温度)等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立ELI SA 方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2 小时,产物的生成可达顶峰。为加速反应,可提高反应的温度,有些试验在 43℃进行,但不宜采用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为彻底,在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过夜,以形成*多的沉淀。但因所需时间太长,在ELISA 中一般不予采用。
保温的方式除有的 ELISA 仪器附有特制的电热块外,一般均采用水浴,可将ELISA 板置于水浴箱中,ELISA 板底应贴着水面,使温度迅速平衡。为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,此时可让反应板漂浮在水面上。若用保温箱,ELISA 板应放在湿盒内,湿盒要选用传热性良好的材料如金属等,在盒底垫湿的纱布,*后将ELISA 板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度,特别是在气温较低的时候更应如此。无论是水浴还是湿盒温育,反应板均不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。室温温育的反应,操作时的室温应严格限制在规定的范围内,标准室温温度是指 20-25℃,但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。室温温育时,ELISA 板只要平置于操作台上即可。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。为保证这一点,一个人操作时,一次不宜多于两块板同时测定。
客户好评
八、来自同济大学魏老师对我司“人细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒”的使用感言
同济大学魏老师说,*次知道【上海沪鼎生物科技有限公司】是在百度上查产品看见的,后来才知道他们同校的齐老师有过在我司选购产品的经验,先在在齐老师那里打听一二才决定在我司咨询产品的。从魏老师*次在我司购买产品到现在差不多有六年多的时间,期间一直都在我司选购ELISA试剂盒产品,对我司产品客服以及销售模式都非常了解,昨日魏老师来电咨询产品就和我司业务经理聊起了对我司ELISA试剂盒的使用感言以及建议!
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感谢魏老师的支持与建议,您的宝贵建议我司定当商讨出解决方案,尽量缩短一些货期。公司一直致力于不断倾听、挖掘与满足客户的各种需求,孜孜不倦地追求产品和技术服务的突破与创新,立志成为国际上有影响力的、对生命科学研究有巨大推动作用的中国生物技术公司。
 

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